ABSTRAKrn(A) SOEPIYAN SAUORI ( 2007210208 )rn(B) PENGEMBANGAN METODE ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) KOMPETITIF LANGSUNG UNTUK DETEKSI SENYAWA OTA (Okratoksin A) DENGAN PEREAKSI KONJUGAT OTA – HRPO (Horse Raddish Peroxidase)rn(C) xii + 58 halaman; 2012; 2 tabel; 19 gambar; 8 lampiranrn(D) Kata kunci : ELISA kompetitif langsung, konjugat, okratoksin A, HRPOrn(E) Okratoksin A (OTA) merupakan jenis mikotoksin yang berbahaya, mempunyai efek toksik dan stabil pada bahan pangan/pakan. Sehingga dapat menyebabkan beberapa kerusakan organ, terutama ginjal pada hewan dan manusia. Oleh karena itu, pengawasan terhadap penyebaran okratoksin perlu dilakukan pada bahan pangan/pakan dengan mengembangkan teknik analisis metode imunokimia yang mempunyai respon sensitif dan spesifik seperti ELISA kompetitif langsung. Tujuan penelitian ini adalah untuk pengembangkan ELISA kompetitif langsung dengan menentukan konsentrasi antibodi anti OTA yang dapat memberikan respon optimal pada pengenceran konjugat OTA – HRPO (Horse Raddish Peroxidase) terkecil. Jika dicapainya kondisi tersebut, maka akan digunakan dalam tahap analisis selanjutnya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi optimal dari antibodi anti OTA yang dilapisi pada mikroplat adalah 10 μg/mL dengan pengenceran konjugat enzim OTA – HRPO sebesar 1/2700 pada waktu inkubasi konjugat selama 45 menit. Pada kondisi pengenceran konjugat tersebut didapat nilai OD (Optical Density) 0,812. Pada uji linearitas kurva kalibrasi, diperoleh nilai r = 0,981 dimana pada konsentrasi standar OTA tertinggi (100 ppb), memberikan nilai inhibisi 76,4 %. Metode ELISA kompetitif langsung spesifik untuk pengujian OTA, reaksi silang terhadap AFB1 (0,86%) dan tidak ada reaksi silang dengan aflatoksin lain (AFB2, AFG1, AFG2).rn(F) Daftar rujukan: 27 buah ( 1971 – 2012 )rn(G) Dra. Titiek Martati, M. Si., Apt.; Sri Rachmawati, B. Sc., M. Sc.rn(H) 2012